防治奶牛臨床子宮內(nèi)膜炎的抗微生物藥
靶動物安全性和有效性試驗指導原則

一、概述

（一）目的

為指導申報單位開展抗微生物藥防治奶牛臨床子宮內(nèi)膜炎的安全性和有效性研究，特制定本指導原則。

（二）適用范圍

適用于治療奶牛臨床子宮內(nèi)膜炎的抗微生物藥物。

（三）術語

臨床子宮內(nèi)膜炎（Clinical endometritis）：在產(chǎn)后21天或以后發(fā)生，從陰道中排出子宮黏液膿性或膿性分泌物，但無全身癥狀。

二、防治臨床子宮內(nèi)膜炎產(chǎn)品的靶動物安全性試驗

（一）概述

申請單位必須證明擬上市的防治奶牛臨床子宮內(nèi)膜炎產(chǎn)品對靶動物的安全性。下述安全性試驗用于證明受試藥物對靶動物的安全性。另外，在療效試驗期間，藥物發(fā)生的任何不良反應也應予以報告。

（二）受試動物

選擇10頭產(chǎn)后無臨床子宮內(nèi)膜炎的健康奶牛，對每一受試動物的描述應說明年齡、泌乳階段、生產(chǎn)次數(shù)以及日產(chǎn)奶量情況。

（三）受試藥物

擬用于治療臨床奶牛子宮內(nèi)膜炎的制劑。

（四）藥物處理

1. 處理前期

在處理前，應采用直腸觸診、陰道檢查和/或B超診斷評價奶牛子宮狀態(tài)，并進行評分（見表1）。

2. 藥物處理

以推薦劑量和給藥方案給藥。

3. 處理后期

給藥后3周（下一個生殖周期）或21～30日（下一個生殖周期不發(fā)情奶牛），應采用直腸觸診、陰道檢查和/或B超診斷評價奶牛子宮狀態(tài)，并進行評分（見表1）。

（五）數(shù)據(jù)收集與結果評價

藥物處理前、處理期間及處理后期的資料應包括動物身份的識別信息、試驗地點、試驗動物數(shù)、觀察日期、試驗天數(shù)，每頭牛的奶產(chǎn)量和體溫。

根據(jù)收集的上述數(shù)據(jù)及臨床檢查結果確定防治奶牛臨床子宮內(nèi)膜炎產(chǎn)品對靶動物的安全性。

三、防治臨床子宮內(nèi)膜炎產(chǎn)品的藥物有效性研究

（一）一般性原則

1．對于防治奶牛臨床子宮內(nèi)膜炎的藥物，其用藥條件是：在產(chǎn)后21日以后，奶牛至少應存在一種入侵子宮的病原體感染和存在奶牛陰道排出非正常的子宮分泌物的癥狀。

2．在臨床研究中，子宮內(nèi)膜炎致病菌的分布情況將用于確定標簽療效的說明，因此在研究中要有足夠數(shù)量（不少于2類菌種共計不少于60株）的主要子宮內(nèi)膜炎的致病菌以證明其療效，同時對分離的致病菌進行擬申請獸藥活性成分的藥敏試驗。

3．收集的數(shù)據(jù)應來自具有代表性的牛群。為此，應對靶牛群中所有奶牛進行檢查，所有符合條件的奶牛都應包括在試驗中。應提交牛群/奶牛的一般性描述數(shù)據(jù)，包括整個成年牛群的大小、當前泌乳的奶牛數(shù)、牛群整體的受孕率，每頭奶牛的大致年齡及品種、日產(chǎn)奶量。

4．微生物學分離培養(yǎng)上，治療前子宮分泌物中分離出的病原體在治療后的檢測樣本中應不能再分離到。如果治療前未分離到某種病原體，則治療后的樣本中同樣不應分離到同種病原體。

5．來自III期臨床的子宮內(nèi)膜炎病原體分離情況將被用于確定標簽的療效說明。例如：對化膿隱秘桿菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌等所致子宮內(nèi)膜炎有效的抗微生物藥物適應證是：“用于治療由化膿隱秘桿菌、大腸桿菌和鏈球菌屬如溶血性鏈球菌引起的子宮內(nèi)膜炎”。

（二）臨床試驗

1．子宮內(nèi)膜炎II期臨床試驗

初步評價擬申請的治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的新獸藥對奶牛子宮內(nèi)膜炎的防治作用和安全性，確定合理的給藥劑量方案。試驗設計內(nèi)容如下：

（1）試驗動物及入選和剔除標準

試驗動物選用自然感染病例，均應經(jīng)執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師臨床診斷確證發(fā)生子宮內(nèi)膜炎后方可進行臨床試驗。試驗動物每組不能低于10頭。

奶牛入選標準：入選奶牛體況評分應大于2.5分且至少在產(chǎn)后3周以上。

奶牛剔除標準：體況評分小于2.5分；剖腹產(chǎn)、胎衣不下、陰道損傷等有臨床可見產(chǎn)科系統(tǒng)疾病和其他嚴重系統(tǒng)性疾病的奶牛不能入選；入選15日前經(jīng)全身給藥治療或產(chǎn)后21日之前經(jīng)子宮注入抗菌藥物或生殖激素的奶牛不能入選。

（2）試驗材料

①受試藥物及來源：受試藥物應與擬上市的制劑完全一致、同一劑型，有完整的產(chǎn)品質(zhì)量標準，有符合規(guī)定格式的說明書。受試藥物應來源于同一批號，由申報單位自行研制并在符合GMP條件下的車間生產(chǎn)，并提供中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或其他獸藥檢驗機構出具的產(chǎn)品檢驗合格報告。

②對照藥物及來源：對照藥物應是已經(jīng)在我國批準上市，與受試藥物作用相似、適應證相同的藥物。來源也可為國外市場或由申報單位提供，并提供合法來源證明和產(chǎn)品檢驗合格報告。

③分離菌株：用于測定對受試藥物和對照藥物的敏感性。

（3）試驗分組

臨床試驗均應采用隨機原則分組。具體要求如下：

①根據(jù)受試藥物的藥物的性質(zhì)和體外抑菌試驗結果初步確定給藥劑量，一般設高、中、低3個劑量組，并設藥物對照組（陽性對照組）。

②如果受試藥物是復方制劑，藥物對照組應根據(jù)組方中各主要成分分別設單方臨床推薦劑量對照組。

（4）感染和病例的確診

通過臨床癥狀、直腸觸診、陰道檢查、B超診斷、致病菌的分離和鑒定等確診為試驗所需致病菌感染的發(fā)病奶牛才能作為試驗病例，各組試驗病例的發(fā)病嚴重程度應基本一致。

（5）給藥方案

根據(jù)藥物的性質(zhì)和疾病的特點選擇擬推薦的給藥方案，包括開始給藥時間、給藥劑量、時間間隔和持續(xù)時間等。一般要求在病因確診后開始給藥。

（6）觀察時間和指標

①觀察時間：治療試驗在停止給藥后繼續(xù)觀察不得少于7天。

②觀察臨床癥狀：應詳細觀察和記錄試驗開始后給藥前、給藥后3周（下一個生殖周期）或21～30日（下一個生殖周期不發(fā)情奶牛）后各組奶牛的一般臨床癥狀和特殊癥狀的表現(xiàn)以及癥狀的發(fā)生、發(fā)展、轉歸和消失情況，并盡量用定量指標來評估。臨床癥狀評分可參考下表進行，也可修改但須進行說明。

表1 子宮內(nèi)膜炎評分標準

根據(jù)所采用的診斷方法設置的分值范圍，將臨床子宮內(nèi)膜炎分類為輕度、中度和重度。若4種診斷方法全部采用，可參考以下分類：

表2 子宮內(nèi)膜炎臨床分類

③臨床有效率、治愈率計算

試驗開始后詳細觀察和記錄各組奶牛給藥前和用藥后臨床癥狀評分和發(fā)病程度，分為恢復正?；虬Y狀好轉，按如下公式計算各組奶牛的有效率和治愈率，并采用卡方（χ²）檢驗進行顯著性分析。

臨床治愈率=恢復正常奶牛數(shù)/發(fā)病奶牛數(shù)；

臨床有效率=癥狀好轉奶牛數(shù)/發(fā)病奶牛數(shù)；

必要時，對細菌分離情況進行統(tǒng)計分析。

（7）結果判斷

①試驗的可靠性：在整個試驗中，藥物對照組須有效，否則選擇其它獸藥重做試驗。

②可用有效率和治愈率進行判斷，并與各對照組進行比較及統(tǒng)計學分析。

③結論：確定受試藥物對本適應證的有效劑量和推薦劑量；并提出臨床應用該獸藥的注意事項、不良反應以及獸藥的相互作用等。

2. 子宮內(nèi)膜炎III期臨床試驗

初步評價擬申請的治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的新獸藥對奶牛子宮內(nèi)膜炎的防治作用和安全性，確定合理的給藥劑量方案。試驗設計內(nèi)容如下：

（1）試驗動物及入選和剔除標準

試驗動物選用自然感染病例，均應經(jīng)執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師臨床診斷確證發(fā)生子宮內(nèi)膜炎后方可進行臨床試驗。試驗動物每組不能低于30頭。

奶牛入選標準：入選奶牛體況評分應大于2.5分且至少在產(chǎn)后3周以上。

奶牛剔除標準：體況評分小于2.5分；有剖腹產(chǎn)、胎衣不下、陰道損傷等有臨床可見產(chǎn)科系統(tǒng)疾病和其他嚴重系統(tǒng)性疾病的奶牛不能入選；入選15日前經(jīng)全身給藥治療或產(chǎn)后21日之前經(jīng)子宮注入抗菌藥物或生殖激素的奶牛不能入選。

（2）試驗材料

①受試藥物及來源：受試藥物應與擬上市的制劑完全一致、同一劑型，有完整的產(chǎn)品質(zhì)量標準，有符合規(guī)定格式的說明書。受試藥物應來源于同一批號，由申報單位自行研制并在GMP驗收合格的車間生產(chǎn)，并提供中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或其他獸藥檢驗機構出具的產(chǎn)品檢驗合格報告。

②對照藥物及來源：對照藥物應是已經(jīng)在我國批準上市，與受試藥物作用相似、適應證相同的獸藥。來源也可為國外市場或由申報單位提供，并提供合法來源證明和產(chǎn)品檢驗合格報告。

③分離菌株：用于測定對受試藥物和對照藥物的敏感性。

（3）試驗分組

臨床試驗應采用隨機原則分組。依據(jù)II期臨床劑量篩選試驗獲得的推薦劑量，一般設推薦劑量組和藥物對照組（陽性對照組），如確有必要可增設發(fā)病空白對照組（安慰劑處理組）。

（4）感染和病例的確診

通過臨床癥狀、直腸觸診、陰道檢查、B超診斷、致病菌的分離和鑒定等確診為試驗所需致病菌感染的發(fā)病奶牛才能作為試驗病例，各組試驗病例的發(fā)病嚴重程度應基本一致。

（5）給藥方案

根據(jù)擬推薦的給藥方案，包括開始給藥時間、給藥劑量、時間間隔和持續(xù)時間等，在病因確診后開始給藥。

（6）觀察時間和指標

①觀察時間：治療試驗在停止給藥后繼續(xù)觀察不得少于7天。

②觀察臨床癥狀：應詳細觀察和記錄試驗開始后給藥前、給藥后3周（下一個生殖周期）或21～30日（下一個生殖周期不發(fā)情奶牛）后各組奶牛的一般臨床癥狀和特殊癥狀的表現(xiàn)以及癥狀的發(fā)生、發(fā)展、轉歸和消失情況，并盡量用定量指標來評估。臨床癥狀評分可參考表1進行，也可修改但須進行說明。

③臨床有效率、治愈率計算

試驗開始后詳細觀察和記錄各組奶牛給藥前和用藥后臨床癥狀評分和發(fā)病程度，分為恢復正?；虬Y狀好轉，按如下公式計算各組奶牛的有效率和治愈率，并采用卡方（χ²）檢驗進行顯著性分析。

臨床治愈率=恢復正常奶牛數(shù)/發(fā)病奶牛數(shù)；

臨床有效率=癥狀好轉奶牛數(shù)/發(fā)病奶牛數(shù)；

必要時，對細菌分離情況進行統(tǒng)計分析。

（7）結果判斷

①試驗的可靠性：在整個試驗中，藥物對照組須有效，否則選擇其他獸藥重做試驗。

②可用有效率和治愈率進行判斷，并與各對照組進行比較及統(tǒng)計學分析。

③結論：確定受試藥物推薦劑量給藥對本適應證的有效性。

附

臨床子宮炎（Clinical metritis）：未出現(xiàn)全身性癥狀，但子宮異常增大，自陰道中排出水樣紅褐色液體至灰白色膿性子宮分泌物。

產(chǎn)后子宮炎：是一種通常發(fā)生在奶牛產(chǎn)后10日內(nèi)由子宮病原菌感染導致的急性系統(tǒng)性疾病。在產(chǎn)后21日內(nèi)，主要臨床癥狀包括：奶牛子宮異常增大并排出紅褐色惡臭的水樣分泌物，嚴重病例同時伴有全身癥狀如產(chǎn)奶量下降、精神沉郁、食欲不振或厭食、心率加快和毒血癥癥狀，體溫超過39.5℃。產(chǎn)后子宮炎通常伴隨胎衣不下、難產(chǎn)、死胎，通常多發(fā)生在產(chǎn)后7日內(nèi)，極少發(fā)生在產(chǎn)后7～14日內(nèi)。

子宮炎：是指奶牛子宮復舊延遲并且惡露排出期延長，但無發(fā)熱癥狀。

子宮積膿：奶牛產(chǎn)后存在持久黃體并且宮頸封閉，子宮內(nèi)存在膿性分泌物積聚的癥狀。

來源：獸藥評審中心

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